全世界有超过2 . 5亿人感染了慢性乙型肝炎病毒(HBV)。长期HBV感染可导致严重的肝损伤，包括肝纤维化、肝硬化和肝癌。据世界卫生组织统计，每年有60万人死于HBV病毒感染。本文将介绍乙型肝炎的研究进展。
1. 普林斯顿大学开发出研究慢性乙肝的细胞培养新系统长期以来，研究人员很难在实验室中培养HBV感染的肝细胞，因为当肝细胞从肝组织中分离出来时，其功能只能维持几天。这使得开发治疗慢性乙型肝炎的药物变得困难.最近，普林斯顿大学开发的一种新的细胞培养系统有望改变这种情况。本研究发表于2017年7月25日《Nature Communications》。
普林斯顿大学分子生物学助理教授亚历山大普洛斯(图片来源：《普林斯顿杂志》)
根据普林斯顿大学分子生物学助理教授亚历山大普洛斯(Alexander Ploss)的说法，以前肝细胞和成纤维细胞共培养的系统有很多局限性：只有来自少数供体的细胞才能在感染后生长，感染最长可持续14至19天，还需要抑制抗病毒细胞信号通路。为了解决这些问题，Ploss博士的研究小组测试了一个不同的系统。他们将原代人肝细胞与非实质基质肝细胞共培养，其功能是支持肝实质细胞。当在涂有胶原蛋白的容器中培养时，这些共培养的细胞可以自发组装成肝样结构。这些肝样结构可以持续感染HBV超过30天，没有必要使用抗病毒信号抑制剂来抑制免疫反应。此外，该系统对来自不同供体的肝细胞有效，也适用于从长期感染者中分离出的HBV病毒。在过去，那些病毒比实验室培养的病毒更难操作。
2. 大阪大学研究者用基因编辑技术清除HBV感染产生的共价闭合环状DNA
当一些病毒感染宿主细胞时，会产生共价闭合环状DNA(简称cccDNA)，这些cccDNA会永久留在细胞核内。cccdna是具有三级结构的双链环状DNA，病毒需要cccdna来完成其复制周期。HBV的典型特征之一是cccDNA的产生。现有的治疗方案难以有效和永久地从感染细胞中去除HBV的cccDNA，从而难以根除该疾病。
近年来，基因编辑“魔剪”CRISPR-Cas9可以在指导RNA(gRNA)的指导下有效地剪切基因，引起双链断裂和随后的非同源序列末端链接(NHEJ)，使编辑后的基因发生突变而失活。但CRISPR-Cas9的脱靶效应也令人担忧。为了增强特异性，大阪大学的研究人员使用“单切口酶”nickase-Cas9编辑HBV的cccDNA，希望使其失活。Nickase-Cas9是Cas9酶的改进版本，它只包含一个催化活性功能区，其切口酶只能切割双链DNA的一条链以产生切口。在实践中，一对镍酶-Cas9通常用于切割两条DNA链。这种酶大大增加了基因编辑的准确性。
在《Scientific Reports》发表的论文中，第一作者、大阪大学研究人员Takeshi Kurihara等人针对HBV的多种保守序列区域设计了多个指导RNA，然后采用nickase-Cas9成功地切断了HBV的cccDNA，抑制了HBV的复制。研究人员还发现，只有nickase-Cas9与病毒基因组结合，但它可以阻止病毒在被切割前复制。研究人员还在老鼠身上进行了动物实验，并成功切割了HBV的基因组。该研究有望为HBV的治疗开辟新的途径。
3. Eiger Biopharma公司完成针对HDV的新药的二期临床实验患者招募
丁型肝炎是由丁型肝炎病毒(HDV)感染引起的最严重的病毒性肝炎之一。它只发生在已感染HBV的患者身上，可严重加重肝损伤，加速肝纤维化和肝癌。约4.3-5.7%的慢性乙肝患者携带HDV。近年来，慢性乙型和丙型肝炎患者受益于这两种肝炎的抗病毒治疗进展，但不幸的是，丁型肝炎(一种侵袭性肝炎)仍然缺乏批准的治疗方法。
Eiger Biopharma是一家处于临床阶段的生物制药公司，专注于开发罕见疾病的靶向治疗。7月24日，他们宣布已经完成了一种治疗HDV新药的二期临床试验的患者招募工作。该试验将测试聚乙二醇化干扰素1a(或“”)对患者的效果，并评估每周两次皮下注射该药物48周的安全性、耐受性和疗效。临床试验将在新西兰、以色列和巴基斯坦进行，共有33名患者参加。临床研究的结果将于今年第四季度提供。
聚乙二醇化干扰素1a是一种新型干扰素，可以刺激宿主的免疫反应，这是在病毒感染期间保护宿主的关键。与干扰素靶向的型干扰素受体不同，干扰素的靶点是型干扰素受体，在肝细胞中高表达，但在造血和中枢神经细胞中表达有限。这种不同的靶分布可以减少脱靶效应并提高药物耐受性。虽然Lambda不使用干扰素的受体，但通过干扰素或干扰素受体复合物的信号转导也导致相同的Jak-STAT信号转导级联的激活。
Eiger总裁兼首席执行官大卫科里(David Cory)表示，“Eiger现在有两种抗HDV产品(lonafarnib和Lambda)在开发中，包括口服和皮下药物，可以单独使用或联合使用。希望未来可以为医生和患者提供HDV治疗的多种选择。”
4. FDA认为Dynavax乙肝疫苗有效，但安全性仍需观望
根据FDA 7月26日发布的报告，Dynavax Technologies公司开发的实验性乙肝疫苗Heplisav-B是有效的，但其安全性需要更多的考虑。接受这种疫苗的患者的死亡人数和严重心脏病的发病率高于对照组。但是，心脏问题的总体数量和发生率相对较低，心脏并发症的评估方法存在局限性：“数据不足以表明疫苗引起的心脏问题是肯定的”。最近，专家将讨论是否批准该疫苗上市。因为安全问题，FDA已经拒绝了这种产品两次。如果这次疫苗能获批，对乙肝患者来说是一大福音。
HEPASAV-B疫苗旨在增强人体对乙肝病毒的免疫反应。Dynavax公司认为，在Heplisav-B实验组中观察到了更多的心脏病病例，因为对照组中发生心脏问题的病例比预期的要少，这使得相比之下，Heplisav-B实验组似乎出现了更多的心脏问题。FDA的一位心脏病专家认为这一理由“合理”，并建议在产品标签上注明这一差异，并在产品进入市场后继续进行安全性监测。然而，另两位FDA心脏病专家持保留意见，认为Heplisav-B与心血管疾病之间的关系需要进一步调查。
5. 杨森达成合作协议，开发乙肝疫苗
巴伐利亚北欧制药公司宣布与让桑制药公司合作开发新药。让桑可以利用巴伐利亚北欧公司的MVA-BN技术开发一种抗乙型肝炎病毒的疫苗。
MVA-BN是巴伐利亚北欧的疫苗研发平台，可以有效针对多种传染病，甚至癌症。它使用灭活的改良安卡拉痘苗病毒。这种病毒的优点是不能在接受疫苗的个体中复制，所以病毒不能在个体中传播，带来了很好的安全性。在接受该公司疫苗治疗的7600多人中，近1000人的免疫系统有缺陷。好在这个平台研发的疫苗具有良好的免疫原性和安全性。
“我们的目标是找到一种控制病毒的方法，找到一种防止疾病发展的方法，并为艾滋病毒感染和乙肝病毒感染带来一种功能性治疗，这样患者就不需要接受终身治疗，”让桑传染病和疫苗部全球R&D主任约翰范霍夫博士说。“全球有2.5亿乙肝患者和3700万艾滋病患者。我们面临着巨大的未满足需求。”
根据目前的协议，让桑将进行所有的临床开发，以及随后的潜在注册和营销。
参考资料：
[1]普林斯顿研究人员报告了研究慢性乙型肝炎的新系统
[2]通过表达镍酶和核酸酶死亡案例9抑制乙型肝炎病毒复制
[3]艾格生物制药公司完成了聚乙二醇化干扰素在丁型肝炎病毒感染中的二期LIMT HDV研究的注册
[4] Dynavax乙肝疫苗工程；引发安全问题：FDA
[5] JJ与巴伐利亚北欧集团签订了一份扩大的疫苗协议，为艾滋病、乙肝项目支付了4300万美元
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